De werkzaamheid van op CD19-gerichte chimere antigen receptor (CAR-)T-celtherapie bij verschillende hematologische maligniteiten heeft celtherapie als nieuwe behandelingsvorm op de kaart gezet. Ondanks de hoge respons, zijn herval door antigen downregulatie/negativering of T-cel uitputting nog een groot probleem. Bovendien is het vinden van optimale doelwit antigenen, vooral voor vaste tumoren, moeilijk. In dit project willen we de werkzaamheid van een op campus ontwikkelde CD70-gerichte T-celtherapie optimaliseren. CD70 werd geselecteerd als doelwit omdat het tot expressie komt in een groot aantal maligniteiten, terwijl het grotendeels afwezig is op gezonde weefsels. We zullen de endogene TCR transformeren in een HLA-onafhankelijke TCR-analoge receptor met behulp van CRISPR/Cas9-gemedieerde gerichte gen insertie. Op die wijze wordt een CD70 gericht nanobody gefusioneerd met de endogene TCR via een TCRVα. We noemen dit construct een nanoTCR. Hiervoor zullen verschillende variabele TCRα-domeinen worden getest. De aangepaste T-cellen zullen worden geëvalueerd met in vitro en in vivo functionele tests. Uiteindelijk zal de beste nanoTCR worden getest in PDX-modellen als brug naar de kliniek. Aangezien CD70 ook tot expressie komt op geactiveerde T-, B- en dendritische cellen, moet mogelijke autoreactiviteit worden beoordeeld. Hiervoor zullen we HIS-muizen gebruiken en hun immunologische functionaliteit beoordelen na CD70-gerichte T-celtherapie.