Het voorgestelde onderzoeksproject heeft als doel de relatie te begrijpen tussen de formulering van mRNA lipide-nanopartikels (mRNA-LNPs) en hun biodistributie naar myeloïde suppressorcellen, evenals de functionele expressie van hun mRNA-lading. Het project bestaat uit vier werkpakketten: WP1 en WP2 richten zich op de formulering en karakterisering van LNPs met behulp van een ontwerp-van-experimentbenadering. De biodistributie en functionele aflevering van verschillende mRNA-LNPs zal gelijktijdig in vivo gemeten worden met behulp van een DNA-barcodesequencing benadering. WP3 voert single-cell sequencing uit om de biologische mechanismen te identificeren die RNA-afgifte sturen. Ten slotte zal in WP4 de verkregen kennis worden gebruikt voor in situ CRISPR-gemedieerde uitschakeling van SIRPα in myeloïde cellen in een syngeen orthotopisch triple-negatief borstkankermodel om de therapeutische werkzaamheid te evalueren, met en zonder gelijktijdige anti-PD-1-behandeling. Herprogrammering van de CD47/SIRPα-as in immuunsuppressieve myeloïde cellen in de tumor micro-omgeving kan de checkpoint-remmingstherapie verbeteren bij triple-negatieve borstkanker.