-
Natural sciences
- Plant cell and molecular biology
Membraantransport vindt plaats met behulp van adaptoreiwitten, die kunnen werken als monomeer of die deel kunnen uitmaken van multimere complexen. In planten zijn er zes multimere adaptoreiwitcomplexen: Adaptor Protein (AP) complex 1 tot 5 en het gerelateerde TPLATE-complex. Deze complexen functioneren op verschillende locaties in het endomembraansysteem en zijn verantwoordelijk voor vesikel-gemedieerd transport van membraaneiwitten. Het doel van dit project is om de cargo’s van de verschillende AP-complexen te identificeren met behulp van affiniteitszuivering gevolgd door massaspectrometrie. Stresscondities, zoals temperatuurstress, zijn verondersteld om ingrijpende veranderingen in het plasmamembraanproteoom te noodzaken. Dit project heeft dan ook als doel om de veranderingen in de samenstelling van de AP-2-afhankelijke endocytische vesikels tijdens verhoogde temperatuurstress te visualiseren, aangezien AP-2 het adaptoreiwitcomplex is dat opereert aan het plasmamembraan. De cargo-eiwitten die we identificeren via massaspectrometrie zullen worden bevestigd via een onafhankelijke benadering, waarbij gebruik zal worden gemaakt van fluorescentie-gebaseerde co-localisatie van de cargo-eiwitten en de verschillende AP complexen aanwezig in de respectievelijke vesikels na vesikelzuivering.