Al decennia worden metabole aandoeningen gediagnosticeerd via enzymatische testen. Eens zo’n diagnose is gesteld moeten het ziekteverloop en de impact van eventuele behandelingen regelmatig worden opgevolgd, wat regelmatige staalafname vereist. De interpretatie van enzymatische testen wordt echter bemoeilijkt vermits de activiteit van de enzymen wordt beïnvloed door externe factoren, die de accuraatheid negatief beïnvloeden. Dit geldt ook voor sfingolipidosen, een subgroep van lysosomale stapelingsziekten waarin sfingolipiden accumuleren door een enzymdeficiëntie. Dit project beoogt het opstellen van accurate bioanalytische methoden die frequente staalafname van patiënten combineert met accurate, high-throughput, volledig geautomatiseerde analyse van een breed lysosfingolipiden panel, vertrekkend van dried blood microsamples. Als basis zal een gevoelige LC-MS/MS methode voor de kwantificatie van lysosfingolipide biomerkers in bloed en plasma worden opgesteld. Na optimalisatie van robuuste, volledige gevalideerde methoden voor de bepaling in klassieke dried blood spots en stalen gecollecteerd via volumetric absorptive microsampling, zullen geautomatiseerde microsample extractie methodologieën worden opgesteld voor toepassing op stalen van gezonde vrijwilligers en patiënten. Hematocriet-gerelateerde problemen, die een impact
kunnen hebben op de betrouwbaarheid van dried blood microsample bepalingen, zullen worden aangepakt aan de hand van hematocriet voorspellende technieken.