ISG15 is een eiwit uit de ubiquitine familie met een belangrijke rol in de afweer tegen virale, bacteriële en schimmelinfecties. Zo zijn cellen deficiënt voor ISG15 erg kwetsbaar voor virale en intracellulaire bacteriële pathogenen, illustratief voor de centrale functie van ISG15 in ons celeigen immuunsysteem. Net zoals ubiquitine markeert en moduleert ISG15 pathogene en gastheer eiwitten, maar de moleculaire impact op eiwitsubstraten is nog steeds onbekend. Tijdens virale infecties modificeert ISG15 nieuw gesynthetiseerde eiwitten op een co-translationele manier, wat impliceert dat ISG15 interfereert met de functie van virale eiwitten als een dominant-negatieve eiwitmodificatie. Dit model houdt echter geen rekening met de antibacteriële activiteit van ISG15 modificatie en bovendien tonen recente ontdekkingen aan dat ISG15 conjugatie op gastheer eiwitten ook een activerend effect kan hebben. Zo kan ISG15 modificatie leiden tot oligomerisatie en intracellulaire translocatie van gastheer eiwitten om bijvoorbeeld invasieve bacteriële pathogenen aan te vallen. Dit project heeft als doel deze hypothese verder te onderzoeken, gebruikmakend van geavanceerde moleculaire en biochemische tools in combinatie met microscopie in cellen geïnfecteerd met de intracellulaire modelbacterie Listeria monocytogenes. Hierbij streven we ernaar om nieuwe, fundamentele kennis te verwerven omtrent ISG15 conjugatie naast het ontdekken van nieuwe antibacteriële gastheer eiwitten.