-
Natural sciences
- Animal cell and molecular biology
- Genetics not elsewhere classified
-
Engineering and technology
- Genetically modified animals
-
Agricultural and food sciences
- Horticultural crop production
De spintmijt Tetranychus urticae vormt een aanzienlijke bedreiging voor de landbouw en ontwikkelt snel resistentie tegen pesticiden. De beschikbaarheid van efficiënte genetische tools is cruciaal voor het begrijpen van de uitzonderlijke aanpassingsmechanismen in deze soort. Voortbouwend op een recente doorbraak met CRISPR/CAS9, kunnen we T. urticae ontwikkelen tot een genetisch model plaagorganisme. Om de efficiëntie van de genbewerking verder te verhogen en het inbrengen van grote DNA-constructen mogelijk te maken, zullen we eerst de DNA-herstelweg in T. urticae in kaart brengen. Door vervolgens cruciale genen te verstoren, zullen we het effect op de frequentie van homology directed repair (HDR) bestuderen. Bovendien zullen we testen of recombinant geproduceerde PiggyBac transposase/PhiC31 integrase, via maternale injectie, in staat zijn om inserties van grote DNA-fragmenten te introduceren. De ontwikkelde technieken zullen uiteindelijk worden gebruikt om een transgene stam te creëren die Cas9 in de kiemlijn tot expressie brengt, waardoor de kosteneffectiviteit en efficiëntie verder kunnen stijgen. Tot slot zullen we de techniek gebruiken om een transgene lijn te creëren die het P450 CYP392A16-gen ectopisch tot hoge expressie brengt, om de invloed ervan op detoxificatie te bestuderen. Dit project zal DNA-herstelmechanismen bij Acari bestuderen, maar vooral strategieën ontwikkelen om genbewerking bij mijten en andere moeilijk te transformeren plaaginsecten mogelijk te maken.