Upstream open leesramen (uORFs) zijn fascinerende translatie-regulatorische elementen die meestal translatie van het primaire ORF inhiberen. Er is een enorme kennislacune in de regulatie van uORFs in het gezonde netvlies en erfelijke retinale ziekte (IRD), een belangrijke oorzaak van blindheid waarvoor gentherapie mogelijk wordt. Door 4000 IRD-patiënten te evalueren, identificeerden we een nieuwe uORF-introducerende mutatie in het RDH12-gen. Daarnaast ontdekten we natuurlijk voorkomende uORFs in PRPH2, een belangrijk ziektegen voor autosomaal dominante IRD met haploinsufficiëntie. Onze hypothese is dat 1) uORFs een rol spelen in retina-specifieke translationele regulatie, en 2) uORFs een nieuw therapeutisch doelwit vormen voor IRD. Om dit te onderzoeken, willen we eerst het uORF-landschap in het menselijk netvlies onderzoeken via een duale strategie van Ribo-seq en N-terminomics, gevolgd door een diepgaande functionele validatie van geselecteerde uORFs. Ten tweede zullen we antisense-oligonucleotide (ASO)-behandeling onderzoeken om de herkenning van de RDH12- en PRPH2-uORF's te blokkeren in zowel reporter assays als wild-type cellulaire modellen, evenals in retinale organoïden van patiënten. Deze innovatieve studie zal belangrijke wetenschappelijke inzichten opleveren in uORF-gemedieerde translationele regulatie in het menselijk netvlies en vertegenwoordigt een unieke proof of concept van uORF ASO's als nieuwe genetische therapie met een potentiële brede toepasbaarheid.