Zoogdiercellen modificeren de eiwitten aan hun celoppervlak en hun gesecreteerde eiwitten met uitgebreide post-translationele carbohydraat modificaties: glycanen. Aangezien we een gedetailleerd inzicht hebben verworven in de biosynthese en functie van glycaan-modificaties, kan hun structuur precies geëngineered worden om de functionaliteit van biofarmaceutische dragereiwitten te optimaliseren. In dit project starten we met de explorering van synthetische biologie van glycanen van therapeutische cellen, met name CAR-T cellen die gebruikt worden in de behandeling van kanker. We stellen ons tot doel om een belangrijke beperking van CAR-T werkzaamheid te overkomen, nl. hun gevoeligheid aan de immunosuppressieve activiteit van tumor-infiltrerende regulatorische T cellen (Tregs). We zullen twee glyco(proteïne) engineering-modules exploreren om deze Tregs in het vizier te nemen. Ten eerste zullen we productie installeren in core-fucosylatie knockout CAR-T cellen van ADCC-versterkt anti-CCR8 nanobody-Fc fusie-eiwit, om tumor Tregs te doden. Ten tweede zullen we CAR-T cellen manipuleren om glyco-engineered IL-2 varianten te produceren die niet langer kunnen binden met de Treg-selectieve CD25 IL-2Ralfa keten. Dit ontzegt Tregs een potente IL-2 stimulering, terwijl de IL-2 stimulering van effector T cellen ongewijzigd blijft. Het gedrag van de gemanipuleerde CAR-T cellen zal geëvalueerd worden in vitro en in vivo, in een immunocompetent syngenetisch muismodel van non-Hodgkin lymphoma.