Doordat het aantal kankerpatiënten blijft stijgen is er nood aan steeds betere kankertherapieën, zoals CAR-T celtherapie. Productie van CAR-T cellen is een langdurig en kostelijk proces aangezien het een autologe therapie is waarbij ook virale vectoren gebruikt worden om de cellen genetisch te wijzigen. Om deze geavanceerde kankertherapie toegankelijker te maken, wordt als alternatief gedacht aan iPSC-afgeleide CAR-T cellen die genetisch gewijzigd worden met niet-virale methodes. Hoewel vaak electroporatie als niet-virale transfectietechniek gebruikt wordt, leidt dit tot hoge mate van celdood naast fenotypische wijzigingen die het therapeutisch potentieel van de cellen verminderen. Een bijkomende moeilijkheid is om iPSCs te laten differentiëren tot functionele T cellen. Vaak is de differentiatie-efficiëntie slechts beperkt, waardoor een lange ex vivo celexpansie nodig is wat tot T cel uitputting leidt naast andere ongewenste fenotypische wijzigingen. Om een oplossing te bieden voor deze moeilijkheden, heeft dit project als doel om allogene CAR-T cellen te produceren door een CAR sequentie te introduceren in de TRAC locus van iPSCs met fotoporatie, een nieuwe transfectietechnologie met minimale perturbatie van de behandelde cellen. Bijkomend, om de differentiatie-efficiëntie te verbeteren, zal TNF signalisatie geactiveerd worden via TNF receptor 2, waarvan recent ontdekt werd dat dit de ontwikkeling van competente T cel precursoren van bloed progenitor cellen sterk verbetert.