Brassinosteroïden (BRs) zijn een groep polygehydroxyleerde steroïde planthormonen die cruciaal zijn voor vele aspecten van het leven van een plant. Hoewel bekend is dat de biosynthese van en signaleringsreacties op BRs variëren tussen cellen en weefsels, ontwikkelingsstadia en omgevingscondities, blijft de spatiotemporele distributie van BRs in vivo onopgelost, vanwege het gebrek aan onderzoeksmiddelen/screening tools. Bovendien, terwijl BRs geen langeafstandstransport ondergaan, blijft het onduidelijk of BRs korte afstanden kunnen overbruggen, en of BRs die in één cel zijn gesynthetiseerd zijn, korte afstanden naar de naburige cellen kunnen afleggen. Hier stellen we voor om de ruimtelijke lokalisatie en overvloed van endogene BRs in Arabidopsis wortels op cellulair niveau te onderzoeken door middel van massaspectrometriebeeldvorming (MSI). Verder zijn we van plan om het intercellulaire transport over korte afstand van BRs in wortels door MSI te ontrafelen met behulp van transgene tools die BR-transport op een gecontroleerde manier kunnen moduleren. Daarnaast zijn we van plan BR-bindende eiwitten te identificeren, wat kan leiden tot de ontdekking van lang gezochte BRtransporters, door middel van beperkte proteolyse-gekoppelde massaspectrometrie (LiP-MS). Dit is een interdisciplinair project waarbij een aantal experts in hun vakgebied betrokken zijn. Wij geloven dat dit onderzoek een krachtige methode zal opleveren om BR-distributie in verschillende weefsels en cellen te volgen, voor het eerst een hoge resolutiekaart van cellulaire BR-distributie in planten te genereren en het al lang bestaande mysterie van BR-transport aan te pakken. De hier verkregen kennis zal de basis vormen voor een verder begrip van de mechanismen die aan de grondslag liggen van de spatiotemporele regulatie van BR-signalering en fysiologische effecten, en die kunnen worden vertaald voor genetische verbetering van gewassen.