In vitro productie van embryo's is populair in de paardenfokkerij, maar suboptimale omstandigheden voor het in vitro rijpen en invriezen van eicellen beperken het volle potentieel van de techniek. Eicellen die in vivo kunnen rijpen, vertonen wel een goede onwikkeling, zowel verse als gevitrificeerde eicellen. Dit wijst op de aanwezigheid van cruciale signaalmoleculen in de natuurlijke omgeving, de groeiende follikel. Extracellulaire vesikels (EVs) in het follikelvocht bevatten regulerende moleculen, zoals microRNAs, die een sleutelrol hebben tijdens de eicelrijping. Onze hypothese is dat het toevoegen van EVs uit follikelvocht van gezonde merries aan het in vitro maturatiemedium de ontwikkeling van verse en gevitrificeerde paardeneicellen kan verbeteren. In dit project worden drie groepen EVs uit follikelvocht, die de folliculaire dynamiek tijdens de eicelrijping vertegenwoordigen, onderzocht. Moleculaire mechanismen onderliggend aan de betere ontwikkeling zullen worden blootgelegd door de microRNAs in de gunstige EVs en hun directe en indirecte effecten op de genexpressie van de cumuluscellen en de resulterende embryo's wordt in kaart gebracht. Tenslotte wordt het effect van veelbelovende kandidaat-microRNAs gevalideerd met behulp van 'mimics' en inhibitoren. Het ultieme doel is om sleutelmoleculen voor het in vitro rijpen en invriezen van eicellen te identificeren, waarbij fundamentele kennis de basis kan bieden voor klinische toepassing bij het paard en andere diersoorten.